在之前的几篇文章中，我们讨论了免疫检测技术的基本原理，例如抗原与抗体之间的识别机制、显色反应的形成过程，以及信号放大的具体方式。同时，我们也回顾了传统和现代免疫检测技术及其各自的应用场景。本篇将不再深入理论，而是“走进实验室”，重点介绍免疫检测中不可或缺的重要试剂，并解释它们的功能及选择建议。

1. 一抗（Primary Antibodies）

ag尊龙凯时的抗体被形象地比喻为“侦探”，负责识别并结合目标分子（抗原）。它们有着强大的特异性，只锁定特定抗原。一抗的主要作用是找到目标抗原并稳固地结合，是整个免疫检测过程的核心。没有一抗，随后的显色等步骤将无法进行。

2. 二抗（Secondary Antibodies）

二抗通常作为一抗的“助攻”，其不直接结合抗原，而是识别一抗，并携带“放大器”（如酶或荧光染料）。由于二抗可以同时结合多个一抗，因此将酶或荧光染料连接在二抗上，可以有效放大最终检测信号，因此二抗在免疫检测中起到增强信号和提高灵敏度的作用。常见类型包括酶标二抗（HRP、AP），荧光标记二抗（FITC、PE），以及金标二抗等。

3. 酶（Enzymes）和底物（Substrates）

在免疫检测中，酶通常与抗体偶联。抗体特异性结合，而酶则催化底物的显色或发光，使实验结果一目了然。常用的酶包括HRP（辣根过氧化物酶）和AP（碱性磷酸酶）。例如，HRP与TMB底物结合可产生蓝色或黄色反应，灵敏度高，常用于ELISA和WB中，而HRP与DAB反应则会生成棕色沉淀，适合免疫组化（IHC）使用。AP与BCIP/NBT底物反应则可产生蓝紫色，适合对背景噪声要求较高的实验。

4. 荧光素（Fluorophores）

除了酶催化产生显色反应，抗体还可以标记荧光素，通过“荧光标签”来方便在荧光显微镜下观察抗体与目标抗原的结合情况。常见的荧光素种类包括FITC（绿色荧光）、PE（橙红色荧光）和Cy5（远红外荧光）等。

5. 偶联试剂（Conjugation Reagents）

如前所述，抗体需要与酶或荧光试剂进行偶联，以将不可见信号转变为可检测信号。常用的偶联剂有SMCC（帮助抗体与酶交联的化学试剂）和EDC/NHS（用于将抗体与小分子底物结合）。

抗体的类型与生产工艺

在免疫检测试剂中，抗体是核心试剂。根据不同生产工艺，抗体可分为单克隆抗体、多克隆抗体及重组抗体。理解抗体的基因重排机制有助于理解不同类型的抗体差异。

1. 抗体基因的免疫重排原理

抗体的多样性源自免疫系统中的B细胞通过“免疫重排”过程生成不同的抗体。每种抗体由重链和轻链两部分组成，这些链条由基因编码。为了产生能够识别不同抗原的抗体，B细胞的基因通过“V(D)J重排”机制进行重新组合，从而形成完整的抗体基因。这种重排是随机的，使每个B细胞产生的抗体具有独特的结合特性。当B细胞接触外来抗原时，将被激活并增殖，产生大量相同抗体分子（克隆），以特异性结合抗原并发挥免疫效应。

2. 免疫检测抗体的不同类型

• 单克隆抗体（mAb）: 从免疫后的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，获得的抗体更具特异性，适合精准检测。
• 多克隆抗体（pAb）:来源于多个B细胞，因此能够识别抗原的不同表位，灵敏度更高。
• 重组抗体: 通过基因工程技术合成抗体序列，并进行表达。这类抗体具有高度的特异性和一致性，适合高端检测和药物开发。

以上是免疫检测试剂中常用的关键试剂及其功能的概述。由于抗体的多样性和应用场景的不同，选择合适的抗体常常需要花费大量时间。下一篇我们将介绍国内外优秀的免疫检测试剂厂商，帮助大家快速找到需要的产品。