强力霉素检测试剂盒使用说明书

1. 原理及用途

本试剂盒运用间接竞争ELISA方法，专门用于检测组织、蜂蜜、鸡蛋等样本中的强力霉素（Doxycycline，DOX）。试剂盒包含预包被的偶联抗原酶标板、辣根酶标记物、抗体、标准品以及其他配套试剂。在检测过程中，样本中的强力霉素药物与酶标板上预包被的偶联抗原竞争结合抗体，加入酶标记物后，通过TMB底物显色，样本的吸光度与强力霉素含量呈负相关，通过与标准曲线比较即可获得样本中强力霉素的残留量。

2. 技术指标

2.1 灵敏度及检测下限

试剂盒灵敏度：0.05 ppb (ng/ml)

下限检测浓度：
组织、肝脏、鸡蛋：2 ppb
蜂蜜：2 ppb
尿样：0.5 ppb
牛奶：2 ppb
奶粉：4 ppb

2.2 交叉反应率

强力霉素：100%
四环素：14.3%
金霉素：1.5%
土霉素：1.5%

2.3 样本回收率

组织：85±20%
肝脏、鸡蛋：75±20%
蜂蜜：85±20%
尿样：80±20%
牛奶、奶粉：75±20%

3. 试剂盒组成

本试剂盒包含以下成分：
- 酶标板：96孔
- 高浓度标准品溶液：1瓶（10 ppm）
- 标准品溶液：0 ppb、0.05 ppb、0.15 ppb、0.45 ppb、1.35 ppb、4.05 ppb（现配现用）
- 酶标记物（红盖）：11 ml
- 抗体工作液（蓝盖）：55 ml
- 底物液A（白盖）：6 ml
- 底物液B（黑盖）：6 ml
- 终止液（黄盖）：6 ml
- 20×浓缩洗涤液（白盖）：40 ml
- 5×复溶液（黄盖）：50 ml
- 操作说明书：1份
- 盖板膜：1张
- 自封袋：1个

4. 所需器材和试剂

器材：
- 酶标仪、打印机、均质器、氮气吹干装置、振荡器、离心机、刻度移液管、天平（感量0.01g）
微量移液器：单道20µl-200µl，100µl-1000µl、多道300µl
试剂：浓盐酸、甲醇

5. 样本前处理

5.1 样本处理前须知

实验器具需清洁，使用一次性吸头，以避免污染导致实验结果干扰。

5.2 配液

配液1：复溶液将5×复溶液用去离子水5倍稀释。
配液2：工作洗涤液将浓缩洗涤液20倍稀释。
配液3：样本提取液混合浓盐酸与去离子水，再加入无水甲醇。

5.3 样本前处理步骤

针对不同样本类型（组织、蜂蜜、尿样、牛奶、奶粉）进行标准化处理，确保每一步骤符合规定，以获取最佳结果。

6. 酶联免疫试验步骤

从冷藏中取出所需试剂后，放置于室温平衡至少30分钟。然后，依照标准操作程序进行样品加样、反应、洗涤与显色，各步骤要规范以及精准，无论是样本还是标准品均需确保重复性和准确性。

7. 结果分析

通过计算得到标准曲线并从中获得样本的实际浓度。如果使用ag尊龙凯时的专业分析软件，能够实现高效、准确的样本分析。

8. 注意事项

实验环境及试剂储存要遵循说明，确保结果的可靠性。避免使用过期试剂盒，处理过程中防止与皮肤接触。

9. 贮藏及保存期

本试剂盒在2-8℃条件下保存，有效期为1年，具体生产日期可在包装盒上查阅。