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犬传染性肝炎病毒(ICHV)检测Elisa试剂盒使用说明 - ag尊龙凯时

来源:姚林堂 日期:2025-03-07

ag尊龙凯时犬传染性肝炎病毒(ICHV)ELISA试剂盒仅供科学研究使用,不得用于医学诊断。

犬传染性肝炎病毒(ICHV)检测Elisa试剂盒使用说明 - ag尊龙凯时

检测原理

本试剂盒采用双抗体一步夹心法的酶联免疫吸附试验(ELISA)技术。检测过程中,首先将样本、标准品及HRP标记的检测抗体依次加入预先包被有adropin(AD)抗体的微孔中,经过适当温育后进行充分洗涤。通过底物TMB显色反应,在过氧化物酶的催化下,TMB由无色转变为蓝色,最终在酸性条件下变为黄色。反应的颜色深浅与样品中adropin(AD)的含量成正比。最后,利用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),进而计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法

1. 血清:使用无热原和内毒素的试管,避免任何细胞刺激,收集血液后以3000转/分钟离心10分钟,迅速小心分离血清与红细胞。

2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂,3000转/分钟离心30分钟,取上清。

3. 细胞上清液:以3000转/分钟离心10分钟,去除颗粒及聚合物。

4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎并以3000转/分钟离心10分钟,取上清。

5. 保存:如样本未及时检测,应按单次用量分装并冻存在-20℃,避免反复冻融。使用时在室温下解冻,并确保样品均匀充分解冻。

操作注意事项

试剂盒的标准品浓度(S0-S5)依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。

试剂的准备

20×洗涤缓冲液的稀释:将蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

洗板方法与结果判断

在Excel工作表中,将标准品的浓度作为横坐标,对应的OD值作为纵坐标,绘制标准品线性回归曲线,并根据曲线方程计算各样本的浓度值。

ag尊龙凯时对此试剂盒的性能做出免责声明,使用前请仔细阅读说明。

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