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液体培养基细菌培养实验步骤 - ag尊龙凯时生物医疗指导

来源:苗枝薇 日期:2025-02-24

在生物医疗研究中,细菌的培养和监测是一个重要的步骤。本文将详细介绍如何使用仪器和耗材进行有效的细菌培养,以便于更好地开展后续实验。

液体培养基细菌培养实验步骤 - ag尊龙凯时生物医疗指导

一、过夜培养

1. 将5ml的预热液体培养基转移至无菌的16mm或18mm试管中。

2. 使用接种环挑取一个单一菌落,浸没于培养液中,并轻轻振动接种环,确保待接种的细菌均匀分散在培养液中。

3. 盖上试管,置于摇床或转鼓式培养装置上,以60r/min的速度于37°C条件下培养,直到达到饱和状态(细胞浓度在1X109~2X109细胞/ml,培养时间约为6小时)。

二、大体积培养

1. 在无菌的Erlenmeyer瓶或baffle瓶中,使用新鲜、预热的培养液按照1:100的比例稀释过夜培养物。瓶的体积应当是培养液体积的5倍以上。如果不进行摇动培养,瓶子的体积应大于培养液体积20倍,以确保良好的通气性。

2. 在37°C下,进行剧烈摇动培养(摇动速度约为300r/min)。

三、利用计数板监测生长情况

1. 用一片干净的盖玻片覆盖在干净的计数玻片上,或者使用血球计。

2. 小心地将一小滴培养液滴在盖玻片的边缘,让培养液自然扩散到盖玻片下方。

3. 在相差显微镜下以400倍放大观察,并通过计算小方块中的细菌数量来估算浓度,约每个小方块中所见的细菌相当于2X107细胞/ml。

四、利用分光光度计监测生长情况

鉴于仪器的差异性,分光光度计在测量之前需用已知浓度的培养液进行校准。

1. 测量OD600。为获得准确读数,可将培养液稀释至OD600<1。

2. 根据每提升0.1 OD值,计算细菌浓度大约相当于108细胞/ml。

通过以上步骤,您可以有效地监测细菌的生长情况,为生物医疗研究提供可靠的数据支持。选择ag尊龙凯时作为您的实验品牌,您将获得专业的产品和服务,助力您的研究事业。

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